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游戲開始前需要確定主角的名字，這里就使用默認的Desmond。游戲開始是一段關(guān)于前兩部《刺客信條》的回憶。動畫之后，古代的主角Ezio身處一場戰(zhàn)斗之中。根據(jù)系統(tǒng)提示不斷按鼠標左鍵，攻擊敵人的首領(lǐng)。但是最后還是會被他躲開。接著鏡頭會切換。

1499年12月 IL Vaticano

按WASD控制角色的移動?？刂平巧白?，在前面金屬杖那邊會有動畫。平臺降了下去，同時主角的叔叔出現(xiàn)。按E鍵進入EAGLE VISON，就可以看到發(fā)光的指示物。跑過去，然后按住鼠標右鍵和空格鍵，還有方向鍵就可以爬上去。爬上去后按WASD來移動，向上爬。

爬上去后，一路跟著叔叔前進。按住鼠標右鍵可以跑動，按住SHIFT鍵可以推開路上的人群。

從屋子里面出來后會開始遇到敵人，按鼠標左鍵攻擊，按住鼠標右鍵進行格擋。

然后一路跟著Mario叔叔前進。按住鼠標右鍵和空格鍵可以快速跑動或跳躍，攀爬。注意從高處跳下是會少血的，跳進草堆中就沒事了。同時還需要干掉路上出現(xiàn)的敵人。

最后兩人爬上了河邊一幢房子的塔頂，然后跳入河中離開。

1500年1月 Monteriggioni

Ezio騎著馬跟隨叔叔回家鄉(xiāng)的城鎮(zhèn)。進入城里后，來到主角的家中。

Ezio與妹妹相見后，需要先去完成3個小任務然后再回家。右下方的小地圖中會有3個感嘆號的可接任務標記。一個任務是幫助婦女搬花，按E鍵對話。接著按Shift鍵搬起花之后跟著婦女到達指定地點。

第二個任務在城外，幫助找回馬匹。快速跑向馬匹，然后快速按Shift鍵上馬，接著騎馬回去交任務。

最后一個小任務是在城墻上，可以跳到屋頂上再爬到城墻上，或者通過任務點附近的梯子上去。和炮臺邊的NPC對話后去藍色標記點的修理工對話后再回到炮臺那里。在修理好大炮后，按Shift鍵使用大炮。用鼠標控制準星然后按鼠標右鍵射擊。干掉小地圖上表示的所有紅色標記點。

完成3個小任務后，回到家中與Caterina還有母親，妹妹見面。按Shift鍵可以開門。動畫之后，上樓進主角自己的房間休息。

第二天早上，小城受到敵人的攻擊。Eizo從家中出來騎上馬向綠色比標記的炮臺騎去。

半路會從馬上跳下來，繼續(xù)向炮臺前進。通過標記點的梯子那里上去。

上去后使用大炮炸毀敵方的火炮。需要先后使用左右兩門大炮。

敵人的箭樓沖到的城墻邊，大量敵人涌到了城墻上。向右邊出現(xiàn)的敵人那里跑過去，爬到箭樓上面，根據(jù)提示換武器，然后按F鍵鎖定下面的敵人，接著按鼠標左鍵跳下去殺死他。

干掉城墻上的所有敵人。此時Ezio的叔叔和Caterina都被抓住。

從城墻上下來帶著同伴回家營救母親和妹妹，干掉路上出現(xiàn)的敵人。此時Ezio受了傷，所以血量上限會減少。

救了妹妹之后跟著她去救母親。然后進入家中的密道逃離小城。

從城里出來后，Ezio讓妹妹帶著母親前往佛羅倫薩，而自己騎馬前往羅馬，但是由于受傷而在中途落馬。第一章結(jié)束。

現(xiàn)實

Desmond醒來，意識回到現(xiàn)實中。眾人來到第一章中Ezio家所在的城鎮(zhèn)。

出門跟著看到的刺客幻象前進，爬到墻上跳下去，找到地道的入口。

Desmond和Lucy一起進入地道。站到機關(guān)上按任意鍵打開門讓Lucy過去。

然后利用邊上突出的木板爬上去。跳到對面的平臺上與Lucy會合。繼續(xù)前進。

前面會有機關(guān)，可以把兩個人升上去。上去后利用木桿跳過去，只要按住鼠標右鍵，空格鍵和W鍵就可以了。過去之后**利用機關(guān)升上去，然后用前面的梯子下去。跳到對面的石頭上爬下去。

使用機關(guān)開門讓Lucy過去，然后利用邊上的墻壁上去。使用機關(guān)讓Lucy前進。

然后跳入水中，游向Lucy那里，爬上去，然后利用Lucy邊上的木板爬到對面去開機關(guān)。

在前面的機械那里，幫助Lucy跳過去開動機械，這樣主角Desmond也能過去了。

過去后爬下梯子，跳到臺子上，利用木板爬上去。然后在木桿上前進去開機關(guān)。接著跳下去與Lucy會合，繼續(xù)前進。

**使用過與前面類似的機械后，爬下樓梯，然后通過木板爬到高處去開機關(guān)，讓Lucy可以上來。

使用機械后，兩人來到房子中，跟著Lucy上樓梯，在木門那里按E鍵進入Eagle Vision。發(fā)現(xiàn)了一串密碼：1419、1420、1421。然后打開邊上的木門，與Rebecca和Shaun會合。

眾人在有雕像的原形房間中建立基地，需要主角去開啟4處電源。跟著Shaun出去，在門外看到第一處電源開關(guān)。

接著跑出莊園進入城鎮(zhèn)中尋找其他三處電源開關(guān)。

由于在現(xiàn)實中無法看到地圖，所以這幾個電源開關(guān)的位置不是很好確定。

使用最后一個電源開關(guān)后，回到基地。

與3人對話后使用Rebecca邊上的智能椅進入虛擬訓練。在45秒內(nèi)盡可能多的連續(xù)殺死敵人。完成訓練后會開始Sequence 2：A Wilderness of Tigers。

Sequence 2：A Wilderness of Tigers 1950年1月羅馬

Ezio被人救起，帶到了羅馬。主角從屋